哈佛团队开发CRISPR-XIST改良方案沉默21号染色体多余拷贝，为唐氏综合征靶向治疗开辟新路径
B910化工消息：4月28日，Beth Israel Deaconess医学中心和哈佛医学院的研究团队发表研究，展示了一种改良CRISPR技术用于靶向唐氏综合征（21三体综合征）的根本病因——21号染色体的多余拷贝。
研究负责人Volney Sheen解释，该策略的核心是将长链非编码RNAXIST插入21号染色体三条拷贝中的一条，使其沉默。XIST在正常发育中负责沉默雌性哺乳动物的X染色体。然而，传统CRISPR插入DNA的效率极低，通常不足1%-2%，难以实现临床可行的治疗。
研究团队开发了一种改良方案，使用四条引导RNA而非传统的两条，产生重叠臂和单链DNA，使同源定向修复效率大幅提升。Sheen表示，该方案达到了约30%的插入效率，足以产生临床适当的反应。
关键技术突破在于利用21号染色体三条拷贝之间的单核苷酸多态性（SNP）差异，选择性地靶向其中一条拷贝上的PAM位点，从而仅沉默多余的那条拷贝而不影响其余两条正常拷贝。
该技术还有望同时治疗唐氏综合征患者常见的早发性阿尔茨海默病。21号染色体上携带三份淀粉样前体蛋白基因，其异常积聚是阿尔茨海默病的标志性病理特征。有效沉默一条拷贝即可从源头降低相关蛋白表达。
团队目前正推进小鼠模型体内实验，面临的主要挑战是如何将CRISPR-XIST构建体递送至足够多的脑细胞中——这是基因治疗领域普遍面临的障碍。日本三重大学团队也采用等位基因特异性编辑方法成功去除多余21号染色体并恢复正常基因表达，为非传统CRISPR方法治疗唐氏综合征提供了多条并行路径。 （来源：Labiotech）
研究负责人Volney Sheen解释，该策略的核心是将长链非编码RNAXIST插入21号染色体三条拷贝中的一条，使其沉默。XIST在正常发育中负责沉默雌性哺乳动物的X染色体。然而，传统CRISPR插入DNA的效率极低，通常不足1%-2%，难以实现临床可行的治疗。
研究团队开发了一种改良方案，使用四条引导RNA而非传统的两条，产生重叠臂和单链DNA，使同源定向修复效率大幅提升。Sheen表示，该方案达到了约30%的插入效率，足以产生临床适当的反应。
关键技术突破在于利用21号染色体三条拷贝之间的单核苷酸多态性（SNP）差异，选择性地靶向其中一条拷贝上的PAM位点，从而仅沉默多余的那条拷贝而不影响其余两条正常拷贝。
该技术还有望同时治疗唐氏综合征患者常见的早发性阿尔茨海默病。21号染色体上携带三份淀粉样前体蛋白基因，其异常积聚是阿尔茨海默病的标志性病理特征。有效沉默一条拷贝即可从源头降低相关蛋白表达。
团队目前正推进小鼠模型体内实验，面临的主要挑战是如何将CRISPR-XIST构建体递送至足够多的脑细胞中——这是基因治疗领域普遍面临的障碍。日本三重大学团队也采用等位基因特异性编辑方法成功去除多余21号染色体并恢复正常基因表达，为非传统CRISPR方法治疗唐氏综合征提供了多条并行路径。 （来源：Labiotech）
